摘要
[目的]探讨大鼠软骨终板干细胞(cartilage endplate stem cells, CESC)来源的外泌体对髓核细胞(nucleus pulposus cells, NPC)以及椎间盘退变(intervertebral disc degeneration, IVDD)的影响。[方法]从大鼠椎间盘中提取并培养CESC和NPC。利用超速离心方法提取并纯化正常CESC分泌的外泌体(Nor-Exos)和高糖诱导衰老CESC分泌的外泌体(Eld-Exos),分别与NPC共培养。Tunel染色和流式细胞检测三组的细胞凋亡数,Western blot检测NPC中Bax,Bcl-2,Cyclin D1和Cyclin D3蛋白表达水平。9只SD大鼠随机分三组,分别为空白对照组、Nor-Exos组和Eld-Exos组,通过针刺法建立IVDD模型并给予相应处理,术后5周行MRI检查,按Pfirrmann评级标准评分。[结果]体外实验,细胞凋亡由低至高依次为空白对照组<Nor-Exos组<Eld-Exos组,总体组间差异和两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。Bax的蛋白表达由低至高依次为空白对照组<Nor-Exos <Eld-Exos组,而Bcl-2、Cyclin D1和Cyclin D3蛋白相表达低至高依次为Eld-Exos组<Nor-Exos组<空白对照组,总体组间差异和两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。体内实验,Pfirrmann分级评分由低至高依次为,空白对照组<Nor-Exos组<Eld-Exos组,总体组间差异和两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。[结论] Eld-Exos显著促进NPC的凋亡,增加椎间盘组织中凋亡蛋白水平,加快IVDD的进展。
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单位武汉科技大学; 武汉市普仁医院