摘要
鸡传染性喉气管炎病毒(Infectious laryngotracheitis virus,ILTV)是一种严重危害我国和世界养禽业的重要病原。本研究以ILTV-LJS09株感染鸡LMH细胞系作为研究模型,开展了全基因组转录谱分析,发现MAPK通路是ILTV感染后最显著激活的通路。进一步应用Western blot鉴定,结果显示ILTV感染可以显著激活宿主细胞p38/MAPK。本研究同时采用脱氢紫堇碱(Dehydrocorydaline,DHC)和佛波酯(Phorbol 12-myristate 13-acetate,PMA)作为p38/MAPK激活剂,采用病毒特异性定量PCR检测病毒基因组拷贝数,通过测定病毒的组织半数感染量检测病毒滴度,应用实时荧光定量PCR检测代谢相关基因的表达水平,使用高内涵成像技术结合Annexin V-FITC/碘化丙啶双染检测细胞凋亡,从而探究药理激活p38/MAPK对ILTV感染的影响。病毒特异性定量PCR检测结果显示,DHC和PMA均显著降低ILTV基因组的复制(P<0.05)。组织半数感染量检测结果显示,DHC和PMA还显著抑制了ILTV感染性病毒粒子的增殖(P<0.05)。实时荧光定量PCR检测结果显示,无论DHC还是PMA对感染细胞代谢基因的总体表达均没有明显影响。高内涵检测结果显示,DHC和PMA显著加剧ILTV感染细胞的凋亡(P<0.05)。综上所述,本研究结果显示DHC和PMA均能够在不影响感染细胞代谢基因表达的情况下,通过加剧ILTV感染细胞的凋亡有效抑制ILTV感染。本研究在ILTV体外感染模型中证明药理激活p38/MAPK具有高效的抗病毒作用,为治疗ILTV感染提供了新的思路,对其它疱疹病毒的防治研究也具有借鉴意义。
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