靶向PERK基因的shRNA真核表达载体的构建及对内质网应激状态下L02肝细胞凋亡的影响

作者：曹洁; 杨朝霞; 沈薇; 姚隆

来源：中国病理生理杂志, 2011, (12): 2376-2381.

• 基因
• PERK
• RNA干扰
• shRNA
• 表达载体
• 细胞凋亡 Genes
• PERK
• RNA interference
• Short hairpin RNA
• Expression vector
• Apoptosis

目的:构建靶向RNA依赖的蛋白激酶样内质网激酶(PERK)基因的短发夹状RNA(shRNA)真核表达载体,观察其对内质网应激(ERS)状态下人正常肝细胞株L02凋亡的影响。方法:根据PERK基因核苷酸序列,按照小干扰RNA(siRNA)靶序列的设计原则,设计并构建靶向PERK基因mRNA的3个特异性shRNA表达载体(PERK1-shRNA、PERK2-shRNA、PERK3-shRNA)和1个无同源性的阴性对照载体(HK-shRNA),经酶切和测序鉴定确认shRNA载体构建成功后,转染L02肝细胞,RT-PCR和Western blotting方法检测PERK基因的表达,筛选出抑制效果最佳的...

• 单位
  重庆医科大学附属第二医院