地高辛标记的DNA探针制备及其应用于溶藻弧菌的检测

作者：周凤丽; 简纪常; 吴灶和

来源：华中农业大学学报, 2009, (04): 459-462.

DOI：10.13300/j.cnki.hnlkxb.2009.04.025

• 溶藻弧菌
• 胶原蛋白酶DNA探针
• 外膜蛋白DNA探针
• 斑点杂交 Vibrio alginolyticus
• collagenase DNA probe
• outer membrane protein DNA probe
• dot blotting

从基因库中获取溶藻弧菌的胶原蛋白酶基因序列和外膜蛋白基因序列,根据基因的保守性用DNAStar分别设计2对引物,分别对溶藻弧菌基因组进行PCR扩增,用地高辛标记扩增的特异DNA片段以制备探针。分别用胶原蛋白酶DNA探针和外膜蛋白DNA探针对实验室保种的溶藻弧菌以及鱼排分离的溶藻弧菌进行斑点杂交检测,检测结果表明,胶原蛋白酶基因探针与保种的溶藻弧菌以及鱼排分离的溶藻弧菌DNA产生较强的阳性反应,而与霍乱弧菌、哈氏弧菌和副溶血弧菌DNA等均无反应,表明该胶原蛋白酶DNA探针的特异性较强;而外膜蛋白基因探针与保种的溶藻弧菌以及鱼排分离的溶藻弧菌DNA产生较强的阳性反应,但与哈氏弧菌和副溶血弧菌DNA...

• 单位
  广东海洋大学; 广东省教育厅