基于TLR4信号通路探讨扶正膏增强细胞免疫功能机制

作者：王继达; 王丽; 满姗姗; 王相玲; 边育红^*

来源：现代中西医结合杂志, 2023, 32(23): 3242-3267.

• 扶正膏
• 环磷酰胺
• 免疫功能低下
• 左旋咪唑
• 细胞免疫

目的 基于Toll样受体4(TLR4)信号通路探讨扶正膏增强细胞免疫功能的机制。方法 (1)将20只雄性ICR小鼠随机分为正常组、免疫功能低下组、扶正膏组、左旋咪唑组，每组5只。除正常组外，其余组小鼠均连续3 d腹腔注射环磷酰胺建立免疫功能低下模型。造模成功后，扶正膏组给予扶正膏2 250 mg/kg灌胃，左旋咪唑组给予左旋咪唑20 mg/kg灌胃，空白组和免疫功能低下组给予等量生理盐水灌胃，均连续灌胃28 d。流式细胞术检测脾脏组织中CD3+、CD4+、CD8+ T细胞比例，Western blot法检测脾脏组织中TLR4、髓样分化因子88(MyD88)、白细胞介素-1受体相关激酶4(IRAK4)、肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)蛋白表达情况。(2)取大鼠20只，给予扶正膏69.6 g/(kg·d)连续灌胃14 d制备扶正膏含药血清。体外分离、培养正常小鼠脾淋巴细胞，分为4组：正常组体外正常培养；扶正膏含药血清组加入10%扶正膏含药血清培养48 h; MyD88抑制剂组加入5μmol/L MyD88抑制剂ST2825培养8 h; MyD88抑制剂+含药血清组加入5μmol/L ST2825培养8 h后，离心去上清，然后加入10%扶正膏含药血清培养48 h。ELISA法检测细胞上清液中白细胞介素-2(IL-2)、干扰素-γ(IFN-γ)表达水平，Wsetern blot法检测脾淋巴细胞中TLR4、MyD88、IRAK4、TRAF6蛋白表达情况。结果 免疫功能低下组脾脏组织中CD4+ T细胞比例和TLR4、MyD88、IRAK4、TRAF6蛋白相对表达量均明显低于正常组(P均<0.05),扶正膏组和左旋咪唑组CD4+ T细胞比例和TLR4、MyD88、IRAK4、TRAF6蛋白相对表达量均明显高于免疫功能低下组(P均<0.05)。扶正膏含药血清组脾淋巴细胞中IL-2、IFN-γ表达水平和TLR4、MyD88、IRAK4、TRAF6蛋白相对表达量均明显高于正常组、MyD88抑制剂组和MyD88抑制剂+含药血清组(P均<0.05),MyD88抑制剂组和MyD88抑制剂+含药血清组IL-2、IFN-γ表达水平和TLR4、MyD88、IRAK4、TRAF6蛋白相对表达量均明显低于正常组(P均<0.05),MyD88抑制剂组和MyD88抑制剂+含药血清组上述各指标比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论 扶正膏可能通过激活TLR4信号通路增强细胞免疫功能。

• 单位
  天津市第二人民医院; 天津中医药大学