摘要
目的观察肝硬化合并自发性细菌性腹膜炎(SBP)患者外周血和腹水中固有淋巴样细胞(ILC)亚群的变化。方法收集2019年11月至2020年11月在驻马店市中心医院住院的62例肝硬化患者的病例资料, 其中肝硬化合并单纯腹水41例(单纯腹水组), 肝硬化合并SBP 21例(SBP组), 同时收集同期进行健康查体的对照者20名(健康对照组)。所有患者和对照者采集外周血, 分离外周血单个核细胞(PBMC), 肝硬化患者常规穿刺获取腹水, 分离腹水单个核细胞, 流式细胞术检测PBMC和腹水单个核细胞中ILC1、ILC2、ILC3亚群的比例变化。分选腹水中CD3-CD19-CD20-CD14-细胞(即lin-细胞), 使用脂多糖(LPS)刺激培养24 h, 实时定量PCR法检测lin-细胞中转录因子T-bet、GATA3和RORγt mRNA相对表达量, 酶联免疫吸附试验检测培养上清中细胞因子水平。比较各组间外周血和腹水中ILC亚群的区别。结果单纯腹水组男29例、女12例, 年龄M(Q1, Q3)为49(33, 78)岁, SBP组男12例、女9例, 年龄50(37, 76)岁, 健康对照组男11名、女9名, 年龄48(32, 69)岁。三组外周血和腹水中均可检测到lin-CD45+CD161+CD127+ILC细胞, 总ILC细胞占PBMC的比例在单纯腹水组、SBP组及健康对照组之间的差异无统计学意义(P=0.235)。总ILC占腹水单个核细胞的比例在单纯腹水组及SBP组之间的差异亦无统计学意义(P=0.232)。CD117-CRTh2-ILC1、CRTh2+ILC2、CD117+CRTh2-ILC3占外周血ILC的比例在单纯腹水组、SBP组及健康对照组之间的差异均无统计学意义(均P>0.05)。SBP组ILC1占腹水ILC的比例高于单纯腹水组(35.69%±3.39%比26.40%±3.85%, P<0.001), 而ILC2占腹水ILC的比例低于单纯腹水组(36.83%±7.70%比48.35%±9.45%, P<0.001), ILC3占腹水ILC的比例在两组间的差异无统计学意义(P=0.230)。SBP组腹水lin-细胞经LPS刺激后T-bet mRNA相对表达量和干扰素(IFN)-γ分泌水平均高于单纯腹水组(均P<0.001), GATA3 mRNA相对表达量、白细胞介素(IL)-5/IL-13分泌水平均低于单纯腹水组(均P<0.05), lin-细胞中RORγt mRNA相对表达量、IL-17/IL-22分泌水平在两组之间的差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论肝硬化合并SBP患者外周血中ILC亚群比例无变化, 腹水中ILC1细胞比例升高, ILC2细胞比例降低。
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单位驻马店市中心医院; 河南省人民医院; 华中科技大学同济医学院附属同济医院