高三尖杉酯碱对白血病细胞凋亡、增殖的影响及对Ras/Raf/MEK通路的抑制作用

作者：齐海燕; 蓝建平^*; 宋晓露; 王晓刚; 王文松

来源：中国医药导报, 2023, 20(25): 20-42.

DOI：10.20047/j.issn1673-7210.2023.25.03

• 高三尖杉酯碱
• Ras/Raf/MEK通路
• 白血病
• 凋亡
• 增殖

目的 探讨高三尖杉酯碱（HHT）对白血病细胞凋亡、增殖的影响及对Ras/Raf/MEK通路的抑制作用。方法 取对数生长期K562、Kasum-1细胞进行研究，分别用0、10、20、50 ng/ml的HHT处理。采用MTT检测相对细胞活力，计算24、48、72 h时细胞IC50，采用克隆形成实验检测检测细胞克隆数量，采用流式细胞仪检测细胞凋亡水平，采用蛋白质印迹法检测Ras/Raf/MEK通路蛋白和凋亡相关蛋白相对水平。结果 24、48、72 h时HHT对K562细胞IC50分别为80.69、65.28、50.76 ng/ml,HHT对Kasum-1细胞IC50分别为85.16、70.11、51.14 ng/ml。培养24、48、72 h时，10、20、50 ng/ml HHT细胞存活率均低于0 ng/ml,20、50 ng/ml HHT细胞存活率均低于10 ng/ml,50 ng/ml HHT细胞存活率均低于20 ng/ml HHT，差异有统计学意义（P<0.05)。10、20、50 ng/ml HHT细胞克隆数均低于0 ng/ml,20、50 ng/ml HHT细胞克隆数均低于10 ng/ml HHT,50 ng/ml HHT细胞克隆数均低于20 ng/ml HHT，差异有统计学意义（P<0.05）。10、20、50 ng/ml HHT细胞凋亡率均高于0 ng/ml HHT,20、50 ng/ml HHT细胞凋亡率均高于10 ng/ml HHT,50 ng/ml HHT细胞凋亡率均高于20 ng/ml HHT，差异有统计学意义（P<0.05）。10、20、50 ng/ml HHT RAS、p-cRAF、p-MEK蛋白表达量均低于0 ng/ml HHT,20、50 ng/ml HHT RAS、p-cRAF、p-MEK蛋白表达量均低于10 ng/ml HHT,50 ng/ml HHT RAS、p-cRAF、p-MEK蛋白表达量均低于20 ng/ml HHT，差异有统计学意义（P<0.05）。10、20、50 ng/ml HHT Survivan蛋白表达量均低于0 ng/ml HHT,Cleaved caspase-3、Cleaved PARP蛋白表达量均高于0 ng/ml HHT;20、50 ng/ml HHT Survivan蛋白表达量均低于10 ng/ml HHT,Cleaved caspase-3、Cleaved PARP蛋白表达量均高于10 ng/ml HHT、50 ng/ml HHT Survivan蛋白表达量均低于20 ng/ml HHT,Cleaved caspase-3、Cleaved PARP蛋白表达量均高于20 ng/ml HHT，差异有统计学意义（P<0.05）。结论 HHT可抑制Ras/Raf/MEK通路活性，抑制白血病细胞增殖和促进白血病细胞凋亡。

• 单位
  人民医院血液科; 杭州医学院; 浙江省人民医院