qRT-PCR快速检测汉滩病毒抗体中和活性实验方法的建立

作者：张晓晓; 张尧; 冯伟; 程林峰; 王芳; 应旗康; 马瑞雪; 马铁军; 刘梓谕; 刘蓉蓉; 张亮; 叶伟; 张芳琳; 徐志凯; 吴兴安

来源：生物技术通讯, 2017, 28(04): 524-527.

DOI：10.3969/j.issn.1009-0002.2017.04.024

• 汉滩病毒
• qRT-PCR
• 中和抗体
• 微量中和实验
• 肾综合征出血热

目的:建立一种基于qRT-PCR的微量细胞中和实验改良法,快速、定量检测汉滩病毒感染中的中和抗体活性。方法:将本室前期制备的抗汉滩病毒高中和活性鼠源性单抗3G1、鼠/人嵌合单抗1D9和感染剂量为100 TCID50的病毒混合液于37℃孵育1 h后感染Vero-E6细胞,提取细胞总RNA。根据GenBank数据库中汉滩病毒76-118株S基因序列设计特异性引物,在上述实验基础上以细胞总RNA为检测样品,建立qRT-PCR快速、定量检测汉滩病毒感染中中和抗体活性的实验方法。结果和结论:建立了一种基于qRT-PCR的微量细胞中和实验改良法,可定量测定汉滩病毒感染中的中和抗体活性,该法具有快速、灵敏、特异和重复性好等优点。

• 单位
  第四军医大学