m6A结合蛋白YTHDC2对人骨髓间充质干细胞分化的影响

作者：文俊儒; 谭震; 林玮民; 李奇文; 袁泉

来源：四川大学学报（医学版）, 2021, 52(03): 402-408.

DOI：10.12182/20210560204

• YTH结构域蛋白2
• 人骨髓间充质干细胞
• 6-腺苷酸甲基化" name="keyword">N6-腺苷酸甲基化
• 成骨分化
• 成脂分化

目的研究N6-腺苷酸甲基化(N6-methyladenosine, m6A)结合蛋白YTH结构域蛋白2(YTH domaincontaining protein 2,YTHDC2)对人骨髓间充质干细胞(human bone marrow mesenchymal stem cells,hBMSCs)成骨及成脂分化的调控。方法通过小干扰RNA(siRNA)体外对hBMSCs进行YTHDC2基因表达的敲降,并进行成骨及成脂诱导分化,以研究YTHDC2敲降后hBMSCs分化表型的改变。利用碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色和茜素红染色鉴定成骨活性和钙结节形成,尼罗红染色检测脂滴形成。利用荧光定量PCR(RT-qPCR)检测成骨和成脂相关基因的表达。通过RNA测序(RNA-seq)分析YTHDC2敲降后的转录组变化,探索YTHDC2调控hBMSCs分化的潜在机制。结果敲降YTHDC2促进hBMSCs成骨分化中的ALP活性及钙结节形成,并显著上调成骨相关基因表达;同时降低了hBMSCs在成脂分化中的脂滴形成能力,并显著下调成脂相关基因表达。RNA-seq的基因富集分析显示YTHDC2与核糖体功能及mRNA翻译有关信号通路显著相关。结论敲降YTHDC2可促进hBMSCs成骨分化,抑制成脂分化。敲降YTHDC2可能造成核糖体功能改变。

• 单位
  口腔疾病研究国家重点实验室; 四川大学华西口腔医院