微小RNA-296对三阴性乳腺癌增殖与凋亡的影响

作者：李晓宇; 贾红燕; 罗飞^*

来源：中华实验外科杂志, 2021, 38(12).

• 三阴性乳腺癌
• 微小RNA-296
• 凋亡
• CX3趋化因子受体1

目的检测微小RNA(miR)-296在三阴性乳腺癌(TNBC)组织及细胞株中的表达, 探讨miR-296对TNBC细胞增殖, 凋亡的影响及其机制。方法 TNBC细胞株人乳腺癌细胞-231(MDA-MB-231), 人乳腺癌细胞-453(MDA-MB-453)及人正常乳腺上皮细胞(MCF10A)购自中国科学院上海细胞生物学研究所, miR-296的过表达及干扰质粒分别转染至细胞株中, 细胞分组为MDA-MB-231、MDA-MB-231-mimics、MDA-MB-231-anti-sh296及MDA-MB-453、MDA-MB-453-mimics、MDA-MB-453-anti-sh296;实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测miR-296在各组细胞中的相对表达量;使用LipofectamineTM 2000脂质体转染miR-296至细胞中, Real-time PCR证实转染成功后;通过细胞增殖-毒性检测试剂盒(CCK-8)检测对细胞生存率的影响;通过集落形成实验检测细胞的增殖能力;流式细胞实验检测miR-296对细胞凋亡的影响。应用SPSS 16.0统计软件分析。结果与癌旁组织比较, miR-296在TNBC组织中的含量明显降低(0.48±0.23比1.00±0.25, t=10.89, P<0.01)。miR-296在TNBC细胞株MDA-MB-231, MDA-MB-453中的表达明显低于正常乳腺上皮细胞MCF10A(0.19±0.08比1.00±0.26, t=8.36, P<0.01;0.46±0.19比1.00±0.26, t=4.68,P<0.01);与对照组比较, 过表达miR-296后MDA-MB-231-mimics和MDA-MB-453-mimics细胞生存率低于转染前[(65.81±10.49)%比(99.39±22.58)%, t=3.82, P<0.01], [(73.17±11.81)%比(100.13±19.35)%, t=3.36, P<0.01];而给予干扰miR-296后细胞生存率较转染前升高;过表达miR-296后, 细胞MDA-MB-231-mimics和MDA-MB-453-mimics的克隆相对值明显低于对照组(0.23±0.10比0.99±0.23, t=8.12,P<0.01), (0.43±0.16比1.01±0.20, t=6.44,P<0.01);而干扰miR-296后的克隆相对值明显高于对照组;过表达miR-296后, MDA-MB-231-mimics和MDA-MB-453-mimics细胞的凋亡百分数高于对照组[(25.76±2.83)%比(6.73±1.09)%, t=17.72, P<0.01], [(21.16±2.92)%比(5.56±0.87)%, t=14.47, P<0.01], 干扰miR-296后细胞的凋亡百分数下降。过表达miR-296后, 细胞MDA-MB-231-mimics和MDA-MB-453-的CX3趋化因子受体1(CX3CR1)的表达量低于对照组(0.36±0.14比1.00±0.20, t=7.45, P<0.01), 0.43±0.10比1.00±0.16, t=8.48,P<0.01);而干扰miR-296后, 细胞MDA-MB-231-sh-296和MDA-MB-453-sh-296的CX3CR1的表达量高于对照组(5.91±1.57比1.00±0.20, t=8.79, P<0.01), (4.89±1.08比1.00±0.16, t=10.03, P<0.01)。结论抑制miR-296的表达, 可以通过靶向作用提高TNBC细胞的生存率, 降低凋亡百分数, 提示miR-296可能通过CX3CR1在TNBC中发挥抑癌作用。

• 单位
  山西省肿瘤医院; 山西医科大学第一医院