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摘要
目的:建立检测大鼠血浆中抗体偶联药物(ADC006M)[重组抗人表皮生长因子受体2(HER2)结构域Ⅱ人源化单克隆抗体-单甲基澳瑞他汀E(MMAE)偶联剂]浓度的酶联免疫吸附分析法(ELISA),并用于研究单次静脉注射的药代动力学特征。方法:基于ELISA的检测原理，在96孔板上预先包被抗MMAE抗体，加入待测样品，用HRP标记的抗体B1G7(B1G7-HRP)进行检测，加入TMB底物显色，终止反应后，在酶标仪450 nm/630 nm波长处读取吸收度(A),并参考相关法规进行方法学验证。同时，单次静脉注射给予SD大鼠5 mg·kg-1ADC006M测定其血浆浓度，对测定结果进行曲线拟合并计算药代动力学参数。结果:确定方法的线性范围为31.25～2 000 ng·mL-1,定量限为31.25 ng·mL-1;方法批内、批间准确度RE分别在-14.6%～12.6%和-13.1%～-0.7%,批内、批间精密度RSD均≤12.6%;方法的选择性(基质效应)、特异性、稀释线性与钩状效应以及各项稳定性考察结果均良好。通过对SD大鼠血浆样品进行浓度测定，获得ADC006M药代动力学参数，雌鼠、雄鼠的Cmax分别为(114 218±17 845)μg·L-1和(119 900±12 259)μg·L-1,AUC0-∞分别为(90 546±6 481)μg·L-1·d-1和(89 648±13 735)μg·L-1·d-1,t1/2分别为(1.46±0.33)d和(1.70±0.28)d。结论:本文建立的检测大鼠血浆中ADC006M浓度的ELISA方法，特异性、准确度、精密度、稳定性等均符合生物制药临床前药代动力学研究指导原则要求，ADC006M在大鼠体内的药代动力学特征不存在性别差异，其与同类ADC药物的代谢特征基本一致，具有较好的药代动力学特性。
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