PF-127-LV-NTFs三维复合支架培养大鼠神经干细胞

作者：梁国新; 梁茵茹; 刘淑贤; 陈康振; 林勇; 秦江霞^*; 吴洪福^*

来源：基础医学与临床, 2022, 42(01): 75-81.

DOI：10.16352/j.issn.1001-6325.2022.01.008

• 神经干细胞
• LINGO-1 shRNA
• PF-127水凝胶
• 神经元分化

目的观察Pluronic F-127(PF-127)水凝胶负载编码慢病毒LINGO-1 shRNA(LV)及神经营养因子混合物(NTFs)(PF-127-LV-NTFs)三维复合支架对大鼠神经干细胞(NSCs)增殖分化的影响。方法构建慢病毒(LV)后以不同感染复数(MOI)感染NSCs,用RT-qPCR及Western blot检测NSCs中LINGO-1的表达;按照一定比例将脑源性神经营养因子(BDNF)、神经营养素-3(NT-3)、血小板衍生生长因子(PDGF)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、表皮生长因子(EGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、神经胶质细胞来源的神经营养因子(GDNF)配制成NTFcocktail(NTFs),PF-127水凝胶负载LV和NTFcocktail并分组培养NSCs;用CCK-8法检测NSCs的细胞活力,LIVE/DEAD染色检测NSCs的存活率,免疫荧光染色检测NSCs增殖和分化情况。结果 LV感染NSCs的最适MOI=5;PF-127对NSCs的细胞活力没有影响;PF-127+LV+NTFs组NSCs存活、增殖及神经元分化比例较高(P<0.01)。结论 PF-127-LV-NTFs三维复合支架有利于大鼠NSCs的增殖和神经元的定向分化。

• 单位
  广东医科大学; 广东医科大学附属第三医院