体外扩增外周血NK细胞对不同肿瘤细胞系的细胞毒作用

作者：蔡惠宁; 钱师宇; 陈伟材; 黄梦淳; 陈文捷; 卢建溪

来源：中华肝脏外科手术学电子杂志, 2022, 11(4): 411-415.

DOI：10.3877/cma.j.issn.2095-3232.2022.04.017

• 自然杀伤细胞
• 细胞毒作用
• 肿瘤细胞

目的 探讨体外扩增的外周血NK细胞对不同肿瘤细胞系的细胞毒作用.方法 人肝癌细胞株BEL-7402、HepG2、SMCC-7721,人肺癌细胞株A549和人宫颈癌细胞株Hela均为中山大学附属第三医院岭南医院生物治疗中心实验室保存并传代.10例健康志愿者外周血均采集自中山大学附属第三医院岭南医院,其中男5例,女5例;平均年龄(52±13)岁.所有受试者均签署知情同意书,符合医学伦理学规定.分离人外周血单核细胞,培养NK细胞,并采用流式细胞术鉴定.采用CCK-8法检测体外扩增的人外周血CD56+CD3-NK细胞对肿瘤细胞毒作用;观察不同波长、培养时间、靶细胞数和不同效靶比等条件下吸光度(A)值.结果 人外周血培养14 d后,CD56+CD3-NK细胞占(61±24)％.靶细胞最佳吸收波长为450 nm,最佳测定时间1～4 h,最佳细胞数量(1～4)x 104个/ml.NK细胞对不同肿瘤细胞系的细胞毒作用不同,其中在效靶比40∶ 1时,对BEL7402作用最强,其后依次为A549、SMMC7721、HepG2,作用最弱为Hela;在20 ∶ 1、10 ∶ 1时,对BEL7402作用最强,其后依次为SMMC7721、A549、HepG2,作用最弱为Hela.NK细胞对3株肝癌细胞的细胞毒作用也不同,其中对BEL7402作用最强,SMMC7721次之,HepG2最弱.NK细胞在效靶比40∶1时对 BEL-7402、SMCC-7721、A549、Hela 细胞的杀伤率明显高于 10∶1 时(LSD-t=2.10,2.37,2.26,5.61;P＜0.05);NK细胞在效靶比40∶1时对A549细胞的杀伤率明显高于20∶1时(LSD-t=1.14,P＜0.05).结论 效靶比40∶1时NK细胞对各肿瘤细胞系的细胞毒作用最强.NK细胞对不同肿瘤细胞系的细胞毒作用不同,对同一种肿瘤不同细胞株的细胞毒作用也不同.

• 单位
  公共卫生学院; 暨南大学; 中山大学附属第三医院