摘要
目的 探讨内皮素-1(ET-1)对大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)钙激活氯通道anoctamin 1(ANO1)表达的影响及机制。方法 以不同浓度(0.1、1.0、10.0、100.0、1 000.0 nmol/L)ET-1处理VSMCs 24 h或用1.0 nmol/L ET-1处理不同时间(1、6、12、24、48 h),观察ET-1对ANO1蛋白表达的影响。用磷酸肌醇-3-激酶(PI3K)抑制剂LY294002阻断PI3K/AKT通路,检测磷酸化AKT(p-AKT)和ANO1蛋白表达的变化。采用组织贴块法进行大鼠胸主动脉VSMCs的原代培养,采用Western blot法检测ANO1蛋白水平。结果 0.1~1 000.0 nmol/L ET-1处理明显促进ANO1蛋白表达(F=4.302,P<0.05),以1.0 nmol/L ET-1作用最为显著(q=8.707,P<0.05)。用1.0 nmol/L ET-1处理细胞不同时间后,ANO1蛋白表达水平增加(F=4.856,P<0.05),其中ET-1作用12~48 h ANO1表达差异具有统计学意义(q=2.903~5.673,P<0.05)。采用LY294002(10μmol/L)预处理后,与ET-1组相比较,LY294002+ET-1组p-AKT和ANO1蛋白的表达水平均显著降低(F=26.340、12.460,q=11.220、8.512,P<0.05)。结论 ET-1对VSMCs的ANO1表达具有明显的上调作用,该作用可能和激活PI3K/AKT信号通路有关。
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单位基础医学院; 青岛大学