猪A群轮状病毒VP6蛋白单克隆抗体的制备及抗原表位鉴定

作者：韩斅; 陈建飞; 时洪艳; 张鑫; 石达; 迟延彬; 李长龙; 冯力

来源：中国预防兽医学报, 2014, 36(11): 885-888.

• A群轮状病毒
• VP6蛋白
• 单克隆抗体
• 抗原表位

为制备猪A群轮状病毒(RV)VP6蛋白的单克隆抗体(MAb)及鉴定其抗原表位,本研究以原核表达、纯化的重组VP6蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾淋巴细胞与SP2/0细胞进行融合,r VP6-GST为包被抗原,通过间接ELISA筛选出一株稳定分泌抗VP6蛋白的MAb杂交瘤细胞株(1F4)。MAb鉴定结果显示其抗体亚类为Ig G1型,轻链为κ链;细胞上清液及腹水效价分别为1∶12 800和1∶106。Western blot和间接免疫荧光结果显示该MAb能够与天然的VP6蛋白反应。应用肽扫描技术鉴定显示该MAb对应抗原表位核心序列为134DYIENWNLQNR144。该MAb的制备为进一步研究VP6蛋白功能和建立RV检测方法奠定基础。

• 单位
  东北农业大学; 兽医生物技术国家重点实验室; 生命科学学院; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所