免疫亲和色谱特异性剔除中药方剂四逆散中的柚皮苷

作者：陈亮; 陈婷; 徐强

来源：色谱, 2006, (03): 243-246.

DOI：10.3321/j.issn:1000-8713.2006.03.007

• 免疫亲和色谱
• 柚皮苷
• 完全抗原
• 特异性剔除
• 四逆散

为了获得剔除柚皮苷(naring in)的中药方剂四逆散样品以供其药理活性探讨时使用,制备了抗柚皮苷抗体的免疫亲和色谱柱,用于特异性地剔除四逆散中的柚皮苷。首先合成了柚皮苷的完全抗原柚皮苷与牛血清白蛋白的结合物naring in-B SA,并用naring in-B SA对新西兰兔进行免疫获得抗血清,再将其纯化后与经CNB r活化的Sepharo se4B凝胶共价偶联制成免疫亲和色谱柱。将四逆散提取物样品溶液上样该色谱柱,洗脱,制得特异性剔除了柚皮苷的四逆散样品。由检测结果可知,naring in-B SA被成功合成。将其用于免疫新西兰兔,获得的抗血清的效价经酶联免疫吸附法(ELISA)测定达到1∶30 000,抗体IgG的纯度达94%,交叉反应率低。在IgG与Sepha-ro se4B合成的IgG-Sepharo se免疫亲和色谱柱中,IgG的偶联率为87%。用该免疫亲和色谱柱处理四逆散后,其中所含的柚皮苷几乎完全被剔除。结果证明,利用抗柚皮苷免疫亲和色谱,能特异性地剔除四逆散或其他样品中的柚皮苷成分。

• 单位
  南京大学; 生命科学学院; 医药生物技术国家重点实验室