高盐对乳鼠心脏成纤维细胞增殖与胶原分泌的影响及相关机制

作者：刘娟; 商黔惠^*; 李璐; 赵宇

来源：中国老年学杂志, 2020, 40(01): 135-140.

• 高盐
• 乳鼠心脏成纤维细胞
• 细胞增殖
• 胶原分泌
• 转化生长因子β1
• p-smad3
• smad7

目的观察高盐对乳鼠心脏成纤维细胞(CFs)增殖及胶原分泌的影响,并分析其可能的相关机制。方法胰酶、Ⅱ型胶原酶两步消化法消化分离乳鼠心肌组织,通过差速贴壁法收集、培养乳鼠CFs。CFs传至第4代去血清同步化24 h,分为对照组(培养基Na+终浓度139 mmol/L)、高盐组(培养基Na+终浓度146、149、152、155、158、161、164、167、170、173和176 mmol/L),培养24、48、72和96 h后,CCK-8检测CFs增殖情况。选择增殖作用最为明显的Na+浓度和作用时间,以Na+ 139 mmol/L为对照进行后续实验,高盐组(培养基Na+终浓度161 mmol/L),甘露醇组(甘露醇浓度为29.334 mg/ml),其中甘露醇组与高盐组渗透压相同。CCK-8检测渗透压对CFs增殖的影响。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测CFs培养上清液中Ⅰ型和Ⅲ型胶原的表达。Western印迹检测CFs中转化生长因子(TGF)-β1、p-smad3及smad7蛋白的表达情况。结果 CCK-8结果显示,Na+ 146～176 mmol/L作用48、72 h可促进乳鼠CFs增殖(Na+ 161 mmol/L作用48 h最明显);检测渗透压对CFs增殖显示,高盐组(Na+ 161 mmol/L)细胞发生增殖明显,而甘露醇组细胞较对照组(Na+ 139 mmol/L)并无增殖差异;ELISA结果显示,高盐组中Ⅰ型和Ⅲ型胶原表达均增加(P<0.05),甘露醇组胶原Ⅰ和胶原Ⅲ表达较对照组比无差异(P>0.05)。Western印迹结果显示,高盐组TGF-β1和p-smad3蛋白表达较对照组和甘露醇组明显增多(P<0.05),smad7蛋白表达明显减少(P<0.05);甘露醇组TGF-β1、p-smad3、smad7蛋白表达与对照组比较无差异(P>0.05)。结论高盐可诱导乳鼠CFs发生增殖,且能够促使Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原分泌增加,且与渗透压改变无关,其机制可能与TGF-β1/smads表达异常相关。

• 单位
  临床医学研究所; 遵义医科大学