淋病奈瑟菌核酸的不同提取方法比较及评价

作者：庄杰; 刘显中; 叶远馨; 周易; 宋兴勃; 陆小军; 王军; 丁柳; 代波; 应斌武

来源：华西医学, 2012, 27(04): 87-90.

• 淋病奈瑟菌
• DNA提取
• 实时荧光定量聚合酶链反应

目的比较评价磁珠法、柱子吸附法和煮沸裂解法3种不同的核酸提取方法对淋病奈瑟菌(淋球菌)DNA提取效率的差异。方法对已确诊的淋球菌培养基挑取20个小菌落制成悬液,做1︰1～1︰100 000稀释度稀释,分别使用磁珠法、柱子吸附法和煮沸裂解法进行DNA提取,用实时荧光定量PCR对其提取效率进行评价。结果在不同浓度淋球菌的DNA提取中,以磁珠法的敏感性和重复性最高,而柱子吸附法和煮沸裂解法次之,<1×105copies/mL以下的拷贝数,3种DNA提取方法之间重复性和敏感性差异明显,磁珠法的提取效率最高,柱子吸附法次之,煮沸裂解法最差;>1×105copies/mL的细菌拷贝数的样本,3种方法差异随浓度增高不断缩小。结论磁珠法提取淋球菌DNA的效率、敏感性和重复性最高,在实际临床科研工作中,各实验室可根据自身实际情况选择不同的DNA提取方法。

• 单位
  四川大学华西医院