骨髓间充质干细胞来源外泌体对大鼠脊髓损伤的改善作用及对脊髓组织胞浆型磷脂酶A2、水通道蛋白4和水通道蛋白9的影响实验研究

作者：唐剑; 陈双华; 何凌

来源：陕西医学杂志, 2023, 52(12): 1654-1659.

• 脊髓损伤
• 骨髓间充质干细胞
• 外泌体
• 组织胞浆型磷脂酶A2
• 水通道蛋白4
• 水通道蛋白9

目的:探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)来源外泌体对大鼠脊髓损伤(SCI)的改善作用及对脊髓组织胞浆型磷脂酶A2(cPLA2)、水通道蛋白4(AQP4)和AQP9的影响。方法:培养BMSCs,提取外泌体并进行鉴定。选择成年雄性SD大鼠30只，分为假手术组、模型组和外泌体组，各10只。采用Allen法制作大鼠脊髓损伤模型，外泌体组经尾静脉注射外泌体，假手术组和模型组大鼠尾静脉注射等体积PBS缓冲液。各组大鼠每隔2 d注射1次，共注射3次。采用脊髓损伤行为学(BBB)评分评估干预前后各组大鼠四肢运动功能。采用HE染色观察脊髓组织结构。采用原位末端脱氧核苷酸转移酶标记法(TUNEL)检测神经细胞凋亡情况。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测脊髓组织PLA2、AQP4、AQP9 mRNA及蛋白表达。结果:BMSCs生长状态良好，外泌体表面标志蛋白CD63、Alix呈阳性表达。干预后3、7 d,外泌体组BBB评分高于模型组(均P<0.05)。假手术组脊髓组织无损伤坏死及出血，结构完整，灰质白质边界清晰，细胞排列有序，细胞核形态正常；模型组大鼠脊髓结构紊乱，大量炎性细胞浸润，伴有囊性腔和空泡，神经元和细胞水肿，神经元数量明显减少；外泌体组脊髓损伤区组织结构紊乱、炎性细胞浸润减轻，脊髓空洞小，损伤恢复较好。假手术组脊髓组织中凋亡细胞较少。模型组细胞凋亡率高于假手术组，而外泌体组细胞凋亡率低于模型组(均P<0.05)。模型组脊髓组织cPLA2、AQP4、AQP9 mRNA及蛋白表达高于假手术组，而外泌体组脊髓组织cPLA2、AQP4、AQP9 mRNA及蛋白表达低于模型组(均P<0.05)。结论:BMSCs来源外泌体对脊髓损伤有一定改善作用，可下调cPLA2、AQP4、AQP9 mRNA及蛋白的表达。

• 单位
  南充市中心医院; 南充市高坪区人民医院