金黄色葡萄球菌肠毒素A检测方法的建立及其应用（英文）

作者：李倩; 武军华; 高珊; 贾培媛; 魏文青^*; 王玉霞^*

来源：中国药理学与毒理学杂志, 2018, 32(10): 757-763.

• 金黄色葡萄球菌肠毒素A
• 单克隆抗体
• 毒素检测

目的建立一种敏感、特异、便捷的方法,用于检测食源性金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)。方法采用经典的细胞融合技术制备抗SEA的单克隆抗体,亲和层析纯化抗体蛋白,ELISA方法测定抗体滴度,免疫层析分析抗体亚型。以抗SEA单抗为一抗,建立Western印迹法,检测不同食物样品中的SEA。结果筛选出3株抗SEA的单抗,命名为SEA-7,SEA-18和SEA-86。纯化后的3株单抗纯度均>90%,抗体滴度均在1∶32 000,经鉴定均为IgG1亚型。利用3株单抗建立检测SEA的Western印迹法,SEA-7的检测灵敏度最高,可达1.56 ng。以SEA-7为一抗,可检测出不同食物中污染的SEA,如污染了1.56 ng SEA的水,污染了5 ng SEA的粥或火腿肠匀浆。结论建立的检测SEA方法可靠灵敏,可用于监测食源性金黄色葡萄球菌污染。

• 单位
  解放军总医院; 药物研究所; 北京市疾病预防控制中心