摘要
通过分别注射0.4、0.8和1.2μg/g(siRNA/体质量)小干扰RNA(short-interfering RNAs, siRNA)来比较不同剂量siRNA对罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)MrTLR1、MrTLR2和MrTLR3等3种TLR基因表达的抑制效果。荧光定量PCR检测结果显示1.2μg/g组为最适干扰剂量。注射MrTLR1-siRNA 24 h以及48 h后罗氏沼虾血淋巴中髓样分化因子88基因(MyD88)、甲壳素基因(Crustin)和抗脂多糖因子基因(ALF)的表达量相对于注射前均显著下降,同时MrTLR2在鳃中的相对表达量上升;在注射MrTLR2-siRNA后,MyD88以及Crustin在血淋巴中的相对表达量明显下降;而在注射MrTLR3-siRNA后,免疫缺陷同系物基因(IMD)在鳃中的相对表达量显著上升,同时ALF在血淋巴中的相对表达量显著上升。此外,3种TLR基因的沉默对酚氧化酶原基因(proPO)的表达没有影响。研究结果表明:MrTLR1和MrTLR2可调控MyD88以及抗菌肽的表达;而MrTLR3不仅参与Toll信号通路调控,同时也可能影响IMD信号通路。
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