髓细胞条件性METTL3基因敲除小鼠的构建与鉴定

作者：陶佳嫦; 秦国慧; 李玲^*; 张毅^*

来源：郑州大学学报(医学版), 2022, 57(04): 509-514.

DOI：10.13705/j.issn.1671-6825.2021.02.070

• METTL3基因
• 基因敲除小鼠
• cre/loxp小鼠
• 髓源抑制性细胞

目的:构建髓细胞条件性METTL3基因敲除小鼠模型。方法:将Lyz2-cre((+/+))雌性小鼠与METTL3((flox/flox))雄性小鼠杂交，得到METTL3((flox/-))Lyz2-cre((+/-))杂合子小鼠，该杂合子小鼠自交，得到METTL3((flox/flox))Lyz2-cre((+/+))小鼠。提取小鼠鼠尾组织DNA,经PCR扩增、琼脂糖凝胶电泳和DNA序列测定，在DNA水平判断小鼠基因型；提取小鼠骨髓细胞RNA,利用RT-PCR法检验METTL3的敲除效率；利用成像流式细胞仪在蛋白水平分析髓细胞中METTL3的敲除效率。结果与结论:在DNA、RNA和蛋白水平分别验证了髓细胞条件性METTL3基因敲除小鼠模型构建成功，该小鼠存活并且可育，为研究METTL3在髓源抑制性细胞功能中的作用提供了研究平台。

• 单位
  郑州大学第一附属医院