NCOA4介导的铁蛋白自噬参与LPS诱导的心肌细胞铁死亡

作者：郭立春; 曹国栋; 罗茜晴; 林靓; 赵宇含; 曾佑成; 张艺馨; 程青虹^*

来源：陆军军医大学学报, 2022, 44(23): 2401-2408.

DOI：10.16016/j.2097-0927.202204140

• 铁蛋白自噬
• 铁死亡
• 脓毒症
• 心肌细胞损伤

目的 探讨核受体辅激活因子4(nuclear receptor coactivator 4,NCOA4)介导的铁蛋白(Ferritin)自噬是否参与脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导的脓毒症心肌细胞铁死亡的发生。方法 采用不同剂量(5、10、20μg/mL)的LPS诱导大鼠心肌细胞H9c2形成脓毒症心肌细胞损伤体外模型，以正常H9c2细胞作为Control组。应用试剂盒检测心肌细胞活力、Fe2+、心肌酶释放水平变化与氧化应激水平；荧光探针检测细胞线粒体膜电位水平变化；免疫荧光检测NCOA4、Ferritin在心肌细胞中的表达定位；应用小干扰RNA(si RNA)降低H9c2细胞中的NCOA4的表达，Western blot检测铁死亡调控蛋白、自噬蛋白表达水平。结果 不同剂量LPS刺激后H9c2细胞活力明显降低(P<0.05),Fe2+浓度升高(P<0.05),丙二醛(Malondialdehyde, MDA)、活性氧(reactive oxygen species, ROS)等细胞氧化应激的水平升高(P<0.05),线粒体膜电位降低(P<0.05),荧光镜下观察到NCOA4-Ferritin共定位表达增加(P<0.05),铁死亡调控蛋白NCOA4表达增加(P<0.05),Ferritin、SLC7A11、GPX4的表达水平下降(P<0.05),自噬蛋白LC3-Ⅱ表达增加(P<0.05)。慢病毒敲低NCOA4表达，Ferritin、SLC7A11、GPX4的表达增加(P<0.05),LC3-Ⅱ表达水平下降(P<0.05)。结论 NCOA4介导的铁蛋白自噬参与了脓毒症心肌细胞铁死亡的发生过程。

• 单位
  石河子大学; 石河子大学医学院第一附属医院