摘要
目的 研究活血胶囊对H2O2诱导的小鼠主动脉平滑肌细胞(mASMC)衰老的抑制作用及分子机制。方法 (1)实验分为对照组、活血胶囊150μg/mL组、活血胶囊300μg/mL组、活血胶囊750μg/mL组,WST-1法检测各组细胞活力。(2)实验分为对照组、H2O2组、活血胶囊+H2O2组,采用SA-β-gal染色法观察细胞衰老情况,采用qRT-PCR法检测细胞衰老相关基因p21和衰老相关分泌因子细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、白细胞介素-8(IL-8)、白细胞介素-6(IL-6)及沉默信息调节蛋白1(SIRT1)mRNA表达量,ELISA法检测细胞培养上清中ICAM-1、IL-8、IL-6水平,流式细胞仪分析细胞周期变化。结果 活血胶囊150μg/mL组、活血胶囊300μg/mL组细胞活力与对照组比较差异均无统计学意义(P均>0.05),活血胶囊750μg/mL组明显高于对照组(P<0.05)。SA-β-gal染色显示,H2O2组衰老细胞明显增多,活血胶囊+H2O2组衰老细胞明显较H2O2组少。H2O2组p21、ICAM-1、IL-8、IL-6 mRNA相对表达量均明显高于对照组(P均<0.05),且活血胶囊+H2O2组p21、ICAM-1、IL-6 mRNA相对表达量均明显低于H2O2组(P均<0.05)。H2O2 5 h组SIRT1 mRNA相对表达量明显低于对照组(P<0.05),活血胶囊+H2O2组明显高于H2O2 5 h组(P<0.05)。H2O2组细胞周期停滞在G1期,G1期细胞比例明显高于对照组(P<0.05),S期细胞比例明显低于对照组(P<0.05);活血胶囊+H2O2组G1期细胞比例明显低于H2O2组(P<0.05),S期细胞比例明显高于H2O2组(P<0.05)。结论 活血胶囊可抑制H2O2诱导的mASMC衰老,其作用与促进细胞中SIRT1表达、抑制ICAM-1和IL-6表达有关。
- 单位