miR-130a靶向G3BP2促进乳腺癌侵袭

作者:付长霞; 冯瑞军; 郑远航; 盛智梅; 孙雪梅; 邓梓坤; 张宝刚*
来源:中国组织化学与细胞化学杂志, 2021, 30(02): 159-165.
DOI:10.16705/j.cnki.1004-1850.2021.02.007

摘要

目的探讨基因预测软件Targetscan预测到的微小RNA-130a如何调节GTP酶激活蛋白SH3功能区结合蛋白2(GTPase activating protein SH3 binding protein 2,G3BP2)的表达,进而影响乳腺癌细胞的侵袭。方法应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测正常乳腺上皮及乳腺癌细胞系中miR-130a的表达水平;蛋白质印迹法(Western blot)检测改变miR-130a表达水平对乳腺癌细胞株MCF-7和MDA-MB-231中G3BP2及上皮间质转化(epithelial-to-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白的影响;双荧光素酶报告基因实验检测miR-130a是否能与G3BP2靶向结合,以及Transwell侵袭实验检测miR-130a表达水平与MCF-7和MDA-MB-231细胞侵袭能力的关系。结果 qRT-PCR显示miR-130a表达量在高侵袭乳腺癌细胞株明显高于低侵袭乳腺癌细胞株MCF-7及正常乳腺上皮细胞;Western blot检测显示,miR-130a负向调控G3BP2的表达并促进乳腺癌细胞发生EMT;qRT-PCR显示改变乳腺癌细胞内miR-130a表达后G3BP2 mRNA基本没有变化;双荧光素酶报告基因结果显示,miR-130a能与G3BP2 mRNA的3’UTR结合;Transwell侵袭实验显示,miR-130a促进乳腺癌细胞的体外侵袭。结论 miR-130a通过靶向结合G3BP2 mRNA的3’UTR区,在翻译水平抑制G3BP2表达后促进乳腺癌细胞发生EMT,从而促进乳腺癌细胞的侵袭。

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