重组融合蛋白 ＥＧＦＥ４ｏｒｆ４多聚体的鉴定及结构分析

作者：倪蓓蓓范真真陈虹黄秉仁

来源：中国生物工程杂志, 2012, (07).

• ＥＧＦＥ４ｏｒｆ４　多聚体　光散射　圆二色谱　生物学活性

目的：确认重组融合蛋白 ＥＧＦＥ４ｏｒｆ４为多聚体及其具有 ＥＧＦＲ结合活性。方法：通过凝胶过滤层析、ＳＤＳＰＡＧＥ和免疫印迹分析重组融合蛋白 ＥＧＦＥ４ｏｒｆ４是否形成聚合物。利用动态光散射、静态光散射和圆二色谱测定 ＥＧＦＥ４ｏｒｆ４的分子半径、分子量和二级结构。应用流式细胞术分析 ＥＧＦＥ４ｏｒｆ４与细胞表面 ＥＧＦＲ结合能力。结果：凝胶过滤等方法证实 ＥＧＦＥ４ｏｒｆ４形成了多聚体，光散射实验证明了 ＥＧＦＥ４ｏｒｆ４多聚体的分子量和分子半径分别为 １．６５６×１０７Ｄａ、６７．９０ｎｍ，约为 ８２０聚体。圆二色谱表明该聚合体融合蛋白含有大量的 β折叠结构。受体结合实验证明该聚合物具有 ＥＧＦＲ结合活性。结论：重组融合蛋白 ＥＧＦＥ４ｏｒｆ４以蛋白多聚体形式存在，可以与ＥＧＦＲ结合。因此，ＥＧＦＥ４ｏｒｆ４作为一种新型靶向性抗肿瘤药物，具有潜在的临床应用前景。

• 单位
  中国医学科学院北京协和医院; 中国医学科学院基础医学研究所; 北京协和医学院