Mic RNA-126与肝癌细胞增殖、凋亡的关系研究

作者：李宁; 崔中锋; 李琤^*

来源：实验与检验医学, 2023, 41(04): 388-394.

• 肝癌
• 细胞增殖
• 细胞凋亡

目的 分析探究micRNA-126与肝癌细胞增殖、凋亡的关系，并筛查作用机制。方法 体外培养人肝癌细胞株HepG2、MHCC97-L、PLC、Huh7以及人肝细胞株L02，将HepG2、MHCC97-L细胞随机分为micRNA-126 mimics组（转染micRNA-126 mimics）、micRNA-126 NC组（转染阴性对照序列）和control组（不转染任何序列），RT-PCR法检测人肝癌细胞株HepG2、MHCC97-L、PLC、Huh7中micRNA-126表达水平以及过表达micRNA-126后HepG2、MHCC97-L中micRNA-126表达水平，MTT法检测HepG2、MHCC97-L细胞增殖能力，流式细胞术检测细胞凋亡能力，Western blot法检测PIK3R2、PI3K、PDK1、AKT、p-PI3K、p-PDK1、p-AKT蛋白水平，建立裸鼠皮下成瘤模型并观察过表达micRNA-126对肿瘤生长的影响，生物信息学软件预测micRNA-126与PIK3R2的靶向关系，采用荧光素酶实验进一步验证micRNA-126与PIK3R2的靶向关系。结果 人肝癌细胞株HepG2、MHCC97-L、PLC、Huh7中micRNA-126表达水平显著低于人肝细胞株L02，且差异有统计学意义（P<0.05）;micRNA-126 mimics组HepG2、MHCC97-L细胞中micRNA-126表达水平显著高于control组和micRNA-126 NC组，且差异有统计学意义（P<0.05）;MTT法检测结果显示，在24 h、48 h、72 h以及96 h时，micRNA-126 mimics组HepG2、MHCC97-L细胞增殖率显著高低于control组和micRNA-126 NC组，且差异均有统计学意义（P<0.05）；流式细胞术检测结果显示，micRNA-126 mimics组HepG2、MHCC97-L细胞凋亡率显著高于control组和micRNA-126 NC组，且差异均有统计学意义（P<0.05）；过表达组裸鼠肿瘤体积显著小于阴性对照组，差异有统计学意义（P<0.05）;micRNA-126 mimics组PIK3R2、p-PI3K/PI3K、p-PDK1/PDK1、p-AKT/AKT蛋白表达水平显著低于control组和micRNA-126 NC组（P<0.05）;PIK3R2为肝癌细胞中micRNA-126的靶基因，与转染WT荧光素酶质粒mimic NC组相比，共转染WT荧光素酶质粒micRNA-126 mimic组荧光素酶活性显著降低（P<0.05），而转染MUT荧光素酶质粒mimic NC组和共转染MUT荧光素酶质粒micRNA-126 mimic组荧光素酶活性比较，差异无统计学意义（P>0.05）。结论 肝癌细胞中micRNA-126下调表达，肝癌细胞中PIK3R2可能是micRNA-126的潜在靶基因，micRNA-126可能靶向负调控PIK3R2表达，抑制肝癌细胞增殖及促进其凋亡。

• 单位
  河南省传染病医院