抗非洲猪瘟病毒噬菌体展示单克隆抗体的筛选及表达

作者：周昊; 胡永新; 常星; 孙举; 仝舟; 毕玉海^*; 吴晓东^*; 尹燕博^*

来源：中国兽医学报, 2022, 42(01): 6-11.

DOI：10.16303/j.cnki.1005-4545.2022.01.02

• 非洲猪瘟病毒
• 单链抗体
• 噬菌体抗体文库
• 真核表达

为构建抗非洲猪瘟病毒(ASFV)噬菌体单链抗体文库，并获得抗ASFV的单链抗体，本试验利用自然感染ASFV猪的外周血淋巴细胞提取的mRNA,反转录获得cDNA后分别扩增出猪IgG抗体重链和轻链的可变区基因，构建scFv单链抗体后连接至pComb3XSS载体，构建噬菌体抗体展示文库，经过3轮“吸附、洗脱、富集”的筛淘过程，成功获得1株能够与ASFV蛋白特异性结合的抗体，并验证了该抗体的反应能力。根据筛选得到的可变区序列构建完整抗体使用HEK293A细胞进行真核表达与验证。结果表明，成功构建了库容量约为9.2×10~(11)PFU/mL抗ASFV噬菌体单链抗体文库，筛选并得到1株与ASFV病毒蛋白亲和性较高的单链抗体，使用真核表达系统成功表达了该株重组抗体。该研究为ASFV的诊断和治疗奠定了一定基础。

• 单位
  中国动物卫生与流行病学中心; 中国科学院; 青岛农业大学; 中国科学院微生物研究所