牛白血病病毒前病毒DNA荧光PCR检测方法的建立及应用

作者：王建华^*; 王玉玲; 张俊哲; 赵丹; 肖妍; 王乃福; 陈本龙; 董志珍

来源：中国兽医科学, 2019, 49(05): 598-603.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2019.0083

• 牛白血病
• 牛白血病病毒前病毒DNA
• env基因
• 实时荧光PCR方法

为快速检测牛外周血淋巴细胞中的牛白血病病毒(bovine leukem ia vir,uBsLV)前病毒DNA,选取BLVenv基因的保守序列设计特异性引物和TaqMan-MGB探针,通过优化反应条件建立检测牛白血病前病毒DNA的荧光PCR方法,并对该方法进行敏感性、特异性和重复性评价及实际样本的验证检测。结果显示,该方法具有很高的特异性和重复性,最低检出限为每个反应可检出3个拷贝数的阳性标准质粒对照。在175头BLV抗体阳性牛中,用该方法共检出127头BLV感染牛。在262头BLV抗体阴性牛中,用该方法检出2头BLV感染牛,该方法与套式PCR之间检测结果的符合率为100%。上述结果表明,本研究建立的方法可用于BLV感染牛的确证。