人卵巢cDNA文库中与蛋白激酶Wee1B相互作用的候选分子的筛选及其调控作用

作者：刘超; 任丽莉; 栾治东; 孟智超; 刘乙蒙; 肖建英

来源：吉林大学学报(医学版), 2016, (05): 866-871+1045.

DOI：10.13481/j.1671-587x.20160505

• 蛋白激酶
• Wee1B
• 蛋白相互作用
• 酵母双杂交
• 小鼠受精卵 protein kinase
• Wee1B
• protein-protein interaction
• yeast two hybrid
• mouse fertilized eggs

目的:利用酵母双杂交系统筛选与蛋白激酶Wee1B相互作用的新候选分子,并用生物信息学方法分析其与Wee1B相互作用是否能调控小鼠受精卵早期发育。方法:以pcDNA3.1/V5 His TOPO Wee1B WT质粒为模板构建pGBKT7Wee1B诱饵质粒;制备酵母感受态细胞,将诱饵质粒pGBKT7Wee1B转化酵母感受态细胞后分别接种SD/Trp(SDO)、SD/Trp/XαGal(SDO/X)和SD/Trp/XαGal/AbA plates(SDO/X/A)培养板检测其对酵母的毒性和自身激活能力,利用Western blotting法检测pGBKT7 Wee1B在酵母中的表达情况;将含有pG...

• 单位
  锦州医科大学