五味子甲素抑制胰腺癌PANC-1细胞迁移和侵袭及其机制探讨

作者：沈伊依; 曾智锐; 雷珊; 薛燕; 江建新^*

来源：肿瘤, 2019, 39(10): 775-783.

• 胰腺肿瘤
• 抗肿瘤药(中药)
• 细胞迁移分析
• 黏着斑蛋白酪氨酸激酶类
• 五味子甲素

目的:探讨五味子甲素(deoxyschizandrin)对人胰腺癌PANC-1细胞迁移和侵袭的影响及其作用机制。方法:用不同浓度(6.25、12.5、25和50μmol/L)的五味子甲素处理胰腺癌PANC-1细胞后,采用CCK-8法检测细胞增殖抑制率,采用划痕愈合实验和Transwell小室法分别检测细胞迁移和侵袭能力的变化。基于五味子甲素的药效团,应用生物信息学软件预测五味子甲素作用的蛋白靶点,并进行通路富集分析。然后采用蛋白质印迹法检测不同浓度(6.25、12.5和25μmol/L)五味子甲素作用后胰腺癌PANC-1细胞中表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)、Src激酶(Src kinase,SRC)、黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)、磷酸化FAK(Y397)(phospho-Y397-FAK,p-Y397 FAK)、桩蛋白(Paxillin)和磷酸化Paxillin(Y181)(phospho-Y181-Paxillin,p-Y181 Paxillin)的蛋白表达水平。结果:五味子甲素以时间和浓度依赖方式抑制胰腺癌PANC-1细胞增殖(P值均<0.05),并明显抑制细胞迁移和侵袭(P值均<0.05)。生物信息学分析发现五味子甲素有113个作用蛋白靶点,这些蛋白靶点明显富集于肿瘤发生相关通路、环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)信号通路和黏着斑信号通路等;其中,五味子甲素作用蛋白靶点EGFR和SRC富集于包括黏着斑信号通路在内的多个信号通路。不同浓度的五味子甲素作用后,胰腺癌PANC-1细胞中EGFR、SRC、p-Y397 FAK和p-Y181Paxillin蛋白的表达水平均明显下调(P值均<0.05),而FAK和Paxillin蛋白表达水平无明显变化(P值均> 0.05)。结论:五味子甲素通过靶向抑制EGFR-SRC信号通路,减少黏着斑相关蛋白p-Y397 FAK和p-Y181 Paxillin的表达,进而抑制胰腺癌PANC-1细胞的迁移和侵袭。

• 单位
  贵州医科大学; 基础医学院; 武汉大学人民医院