慢病毒介导miR-222稳定沉默结肠癌细胞系的构建及其生物学作用

作者：朱朝阳; 赖冬萍; 张涛^*; 丁明健; 卓少元; 黄晓燕

来源：实用医学杂志, 2020, 36(21): 2894-2899.

• miR-222
• 慢病毒
• 结肠癌细胞
• 增殖
• 周期
• 凋亡
• 迁移

目的构建稳定沉默miR-222结肠癌HCT-116细胞系,探讨miR-222对结肠癌细胞增殖、周期、凋亡及迁移能力的影响。方法选取HCT-116细胞,应用TuD RNA(Tough Decoy RNA)构建TUD-hsamiR-222-3p Inhibitor慢病毒载体,分别转染miR-222 Inhibitor(miR-222 I)和阴性对照(NC),未感染慢病毒细胞为正常组(HCT-116)。采用MTS法检测细胞活力及Annexin V-FITC检测细胞凋亡,流式细胞仪检测细胞周期;Transwell小室模型检测细胞迁移能力。结果 miR-222 Inhibitor转染HCT-116细胞后,经荧光显微镜、RT-PCR证实转染成功。与NC组和正常组相比,miR-222 I组细胞活力明显下降;处于S期的细胞比例明显降低,早期细胞凋亡率显著升高。细胞迁移能力明显受到抑制。结论 miR-222基因的沉默能降低结肠癌细胞活力和阻滞周期进程、促进凋亡及抑制细胞迁移能力。

• 单位
  广西中医药大学附属瑞康医院; 广西中医药大学; 广西中医药大学第一附属医院