科研之友
微信
新浪微博
Facebook
分享链接
摘要
为了研究龟鳖类生殖细胞发育分化机制，实验通过RACE技术克隆获得了中华鳖dead end (dnd)基因全长c DNA,RT-PCR分析了其在不同组织的转录表达情况，并通过原位杂交技术检测了dnd mRNA在中华鳖雌雄性腺配子发生过程中的表达变化。结果显示，中华鳖dnd cDNA全长1 251 bp (GenBank登录号为OL757532)，包括234 bp的3’端非翻译区和1 017 bp开放读码框，开放读码框编码338个氨基酸。氨基酸序列比对和系统进化树分析结果表明，中华鳖Dnd蛋白与其他物种同源蛋白一样，均具有6个保守的结构域，其中高度保守的RNA识别结构域是主要的功能结构域。中华鳖Dnd与绿海龟Dnd氨基酸序列一致性最高，亲缘关系最近。RT-PCR结果显示，Psdnd特异性地在中华鳖性腺组织中表达，且在卵巢中的表达明显高于精巢。原位杂交分析结果显示，Psdnd mRNA在生殖细胞中特异表达。在卵巢中，Psdnd mRNA主要在Ⅱ期初级卵母细胞的细胞质中表达，随着卵母细胞的增大，在Ⅳ期及以后的卵母细胞中检测不到其表达。在精巢中，Psdnd mRNA信号在初级精母细胞中表达最强，在次级精母细胞和精原细胞中表达水平次之，在精子细胞中未检测到信号。研究表明，dnd基因可能在调控中华鳖雌雄生殖细胞的发育中起重要作用。
- 单位
