一种检测A型肉毒毒素的高灵敏度酶联免疫吸附法

作者：刘志佳; 李永明; 宋朝君; 李娜; 卢卫嘉; 孙元杰; 毛晓燕; 杨琨; 金伯泉

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2012, (05): 546-548.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.006419

• A型肉毒毒素
• 酶联免疫吸附法
• 重组A型肉毒毒素重链羧基端片段
• 单克隆抗体

目的:建立检测A型肉毒毒素的酶联免疫吸附法。方法:利用重组A型肉毒毒素重链羧基端片段作为免疫原和B淋巴细胞杂交瘤技术,获得了56株高亲和力的抗A型肉毒毒素单克隆抗体(mAb),建立了检测A型肉毒毒素的双mAb夹心酶联免疫吸附法(ELISA)。结果:该方法理论检测下限达到了8.34 pg/mL,检测天然A型肉毒毒素制剂时其实际检测下限可达0.78 LD50/mL,与其他型别的肉毒毒素均未见交叉反应。通过测定基质中的回收率,发现基质中的相关的蛋白对检测具有较大的影响。结论:该方法具有灵敏度高,特异性好,使用方便等优点,具有较高的的实用价值。

• 单位
  第四军医大学; 兰州生物制品研究所