蛋白激酶R样内质网激酶参与维生素E琥珀酸酯激活人胃癌细胞内质网应激和自噬的调控

作者：卓翠竹; 闻新奕; 赵海霞; 段宵阳; 侯丽颖^*

来源：中国病理生理杂志, 2023, 39(05): 788-793.

• 胃癌
• 维生素E琥珀酸酯
• 内质网应激
• 自噬
• 蛋白激酶R样内质网激酶

目的：研究蛋白激酶R样内质网激酶（PERK）在维生素E琥珀酸酯（VES）激活人胃癌细胞发生内质网应激（ERS）与自噬中的影响。方法：体外培养人胃癌细胞系MKN28和MKN45，通过CCK-8法绘制细胞生长曲线，根据生长曲线确定用药剂量。不同剂量的VES处理细胞24 h后，qRT-PCR检测葡萄糖调节蛋白78(GRP78)和beclin-1的mRNA表达，Western blot检测GRP78、微管相关蛋白1轻链3(LC3)、beclin-1及PERK的蛋白表达。用2μmol/L GSK2606414 (GSK)抑制PERK，设置对照组、GSK组、VES组和VES+GSK组，Western blot检测PERK、GRP78、LC3和beclin-1的蛋白表达。结果：CCK-8实验结果显示，VES对两种人胃癌细胞系的活力均有显著抑制作用（P<0.01）。qRT-PCR结果显示，两种细胞中beclin-1和GRP78的mRNA表达均随着VES剂量的增加而不断升高（均P<0.05）。Western blot结果显示，与对照组相比，VES均可以显著上调两种细胞中GRP78、PERK、LC3和beclin-1的表达（均P<0.05）；抑制PERK后，两种细胞中p-PERK/PERK的比值显著下降（P<0.01），相较VES组，VES+GSK组GPR78、LC3和beclin-1的蛋白表达均显著降低（均P<0.05）。结论：VES激活人胃癌细胞发生ERS和自噬的同时上调PERK的表达，而PERK参与了VES对ERS和自噬的调节。

• 单位
  公共卫生学院; 华北理工大学