甜菜RSAP引物筛选及不同检测方法对扩增产物多态性的影响

作者：梁雪梅; 阚文亮; 邳植; 吴则东^*

来源：分子植物育种, 2023, 1-8.

• 甜菜
• RSAP
• 引物筛选
• 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳
• 琼脂糖凝胶电泳

为筛选出适宜于甜菜育种应用的RSAP引物及探究出其扩增产物检测的最优方法。本试验以8份甜菜品种对45对RSAP引物进行筛选，选出多态性较好，分辨率较高的核心引物；对比分析了1.5%琼脂糖凝胶和6%、8%的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测方法对扩增产物多态性的影响。结果表明，从45对RSAP引物中筛选出6对多态性高，稳定性好的核心引物。利用不同的方法检测6对核心引物的扩增产物，均能分离出清晰、可识别的条带，但条带的多态性及比例存在差异。1.5%的琼脂糖凝胶电泳共分离出36条多态性条带；8%、6%的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分别分离出73条、111条多态性条带；即不同方法检测引物扩增产物的多态性时，6%的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测出多态性条带数是8%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测的1.5倍左右，是1.5%琼脂糖凝胶电泳检测方法的3倍左右，说明6%的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测的效率最高，是甜菜RSAP引物扩增产物多态性检测的最优法。该试验为RSAP分子标记在甜菜品种鉴定、指纹图谱构建和遗传多样性分析等方面的研究提供了新的思路和奠定技术基础。

• 单位
  黑龙江省农垦总局; 黑龙江大学