miR-340-5p靶向DNMT1对高糖诱导的小鼠足细胞损伤的影响及其机制研究

作者：黄存军; 欧秋娟; 戴洪波; 何阶德; 梁航; 黄朦; 刘韵^*

来源：中国中西医结合肾病杂志, 2021, 22(05): 417-421.

• miR-340-5p
• DNA甲基转移酶1
• 糖尿病肾病
• 足细胞

目的:探讨miR-340-5p靶向DNA甲基转移酶1(DNMT1)对高糖诱导的小鼠足细胞损伤的影响和分子机制。方法:采用30 mmol/L的D-葡萄糖处理小鼠肾脏足细胞MPC5构建细胞损伤模型。将MPC5细胞分为正常对照(NG)组、高糖刺激(HG)组、HG+miR-NC组、HG+miR-340-5p组、HG+si-NC组、HG+si-DNMT1组、HG+miR-340-5p+pcDNA组和HG+miR-340-5p+pcDNA-DNMT1组。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-340-5p和DNMT1 mRNA的表达;流式细胞术检测细胞凋亡;蛋白质印记(western, Blot)检测DNMT1、肾病蛋白(nephrin)、肾小球足细胞裂隙膜蛋白(podocin)表达。双荧光素酶报告基因实验和Western Blot验证miR-340-5p对DNMT1的靶向调控关系。结果:与NG组比较,HG组MPC5细胞miR-340-5p、nephrin、podocin表达显著降低,DNMT1表达、细胞凋亡率显著升高;与HG+miR-NC组比较,HG+miR-340-5p组MPC5细胞nephrin和podocin表达显著升高,细胞凋亡率显著降低;与HG+si-NC组比较,HG+si-DNMT1组MPC5细胞nephrin、podocin和Bcl-2的表达显著升高,细胞凋亡率显著降低;与HG+miR-340-5p+pcDNA组比较,HG+miR-340-5p+pcDNA-DNMT1组MPC5细胞nephrin、podocin表达显著降低,细胞凋亡率显著升高。结论:miR-340-5p通过靶向DNMT1可抑制高糖诱导的小鼠足细胞损伤。

• 单位
  湘南学院附属医院