摘要
目的比较中晚期骨关节炎(OA)患者软骨细胞自噬相关因子ULK1、Beclin1及LC3表达,并观察雷帕霉素对中晚期OA患者软骨细胞自噬的影响。方法收集膝关节正常软骨标本5例份(正常对照组)、中期OA软骨标本10例份(中期OA组)、晚期OA软骨标本10例份(晚期OA组),体外分离、培养软骨细胞,分别采用实时荧光定量PCR法及Western blotting法检测细胞ULK1、Beclin1、LC3 mRNA及蛋白表达。取各组软骨细胞,分别加入无血清培养基(记做0μmol/L雷帕霉素)及1、5、10μmol/L雷帕霉素,作用54 h后参照上法检测各自噬因子表达。结果与正常对照组比较,中期OA组、晚期OA组细胞ULK1、Beclin1、LC3 mRNA及蛋白相对表达量均降低,且晚期OA组降低更明显(P均<0.05)。与同组加入0μmol/L雷帕霉素处理后比较,正常对照组、中期OA组经5、10μmol/L雷帕霉素处理后ULK1、Beclin1、LC3 mRNA及蛋白表达均升高,晚期OA组经10μmol/L雷帕霉素处理后ULK1、Beclin1、LC3mRNA及蛋白表达均升高(P均<0.05)。与经相同浓度雷帕霉素处理后的中期OA组比较,晚期OA组ULK1、Beclin1、LC3 mRNA及蛋白表达均降低(P均<0.05)。结论中晚期OA患者软骨细胞中自噬相关因子ULK1、Beclin1、LC3表达均降低,且晚期组降低更明显;雷帕霉素可诱导升高正常及中期OA软骨细胞的自噬水平,但对于晚期OA软骨细胞的自噬诱导作用不明显。
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单位苏州市立医院