烟草高亲和硝酸盐转运蛋白基因NtNRT2.5的克隆及表达模式分析

作者：李晨依; 朱紫童; 湛佳伟; 温海洋; 罗勇; 杨永霞; 张松涛; 贾宏昉^*

来源：中国烟草学报, 2023, 1-11.

• 烟草
• NtNRT2.5
• 基因克隆
• 表达分析

【背景和目的】高亲和硝酸盐转运蛋白NRT2家族基因在植物硝酸盐吸收转运和再利用过程中发挥重要作用，为探索烟草NRT2家族基因NtNRT2.5对烟草氮素调控的作用。【方法】从烟草烤烟品种K326中克隆得到高亲和硝酸盐转运蛋白基因NtNRT2.5，进行生物信息和表达模式分析，创制NtNRT2.5启动子融合GUS报告基因的K326转基因烟草材料，进行GUS组织化学染色。【结果】NtNRT2.5基因的全长ORF为1509 bp，编码502个氨基酸，属于稳定性疏水蛋白，其蛋白跨膜结构域具有NRT2家族结构特征；烟草NtNRT2.5蛋白与拟南芥AtNRT2.5蛋白亲缘关系最近，功能相似；该基因启动子包含多种激素和胁迫响应元件；NtNRT2.5蛋白定位于细胞质膜；NtNRT2.5基因在烟草各组织都有表达，在下部叶中表达最强，且受低氮诱导表达增强，GUS组织染色结果表明，正常供氮和低氮条件下，在转基因烟草的根（中轴）和下部叶片（叶脉）中都检测到了GUS报告基因，均能显蓝色，且低氮条件下表达更加强烈，蓝色更深。【结论】烟草NtNRT2.5是高亲和硝酸盐转运蛋白的编码基因，该基因受低氮诱导表达增强，可能参与烟草硝酸盐的转运及再利用过程。

• 单位
  河南农业大学