建立了用高效液相色谱法测定土壤中5种氟喹诺酮类抗生素残留。土壤中残留的氟喹诺酮类抗生素经乙腈/盐酸提取,正己烷去除脂溶性杂质,旋转蒸发器上浓缩至干后定容,用带荧光检测器的高效液相色谱仪测定,外标法定量。通过选择最优流动相、检测波长、色谱柱条件及前处理条件。分析物加标回收率在70.0%~120.0%,变异系数RSD<10%,证明本方法重现性好,可操作强。