邻苯二甲酸酯类对人CYP450酶及对HepG2细胞的影响

作者：杨滨溶; 张浩乾; 郭斌^*

来源：沈阳药科大学学报, 2023, 1-10.

DOI：10.14066/j.cnki.cn21-1349/r.2023.0229

• 邻苯二甲酸酯
• 代谢酶
• 细胞色素P450酶
• 鸡尾酒探针法
• 液相色谱串联质谱法
• HepG2细胞

目的探究20种邻苯二甲酸酯(Phthalateesters，PAEs)对人肝微粒体中CYP450酶系及肝癌HepG2细胞的影响。方法 采取体外初筛抑制试验探究PAEs对CYP450亚型酶的抑制潜力，通过抑制动力学实验分析判断抑制类型，采用体外-体内外推(invitro-invivoextrapolation，IVIVE)法评估抑制效果，利用分子对接模拟试验探讨抑制机制。通过CCK8法、TUNEL实验、JC-1荧光探针检测PAEs对HepG2细胞的影响，WesternBlot测定细胞中CYP亚型酶蛋白表达水平。结果仅有邻苯二甲酸二环己酯(dicyclohexylphthalate，DCHP)和邻苯二甲酸单辛酯(monooctylphthalate，MOP)分别对人CYP1A2和CYP2C9亚型酶呈现较强的非时间依赖、非NADPH依赖的竞争性抑制作用，其半数抑制浓度(half-inhibitoryconcentration，IC50)值分别为(35.02±4.08)μmol·L-1和(18.53±2.17)μmol·L-1。非线性回归分析得出其动力学参数(kineticparameters，Ki)分别为(20.26±3.96)μmol·L-1和(14.37±2.06)μmol·L-1；CCK8结果显示可抑制细胞增殖；TUNEL实验结果显示可导致细胞凋亡；JC-1荧光探针结果显示能使细胞的线粒体膜电位发生改变；WesternBlot结果显示可降低细胞中CYP1A2和CYP2C9蛋白表达。结论 研究发现DCHP和MOP分别对人CYP1A2和CYP2C9亚型酶有抑制作用，均可抑制HepG2细胞的增殖，导致细胞凋亡，降低蛋白表达。

• 单位
  锦州医科大学