摘要
目的探究丹参酮ⅡA对髓母细胞瘤D341细胞的增殖、凋亡及自噬的影响。方法用不同浓度丹参酮ⅡA(0、0.5、1.0、2.0、5.0mg/L)处理D341细胞,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测丹参酮ⅡA对D341细胞增殖的影响;流式细胞仪检测丹参酮ⅡA对D341细胞凋亡的影响;透射电镜技术观察丹参酮ⅡA对D341细胞自噬的影响;Western blot技术检测D341细胞一抗兔抗人雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、磷酸化mTOR(pmTOR)、血管内皮生长因子(VEGF)、一抗兔抗人微管蛋白1轻链3-Ⅰ/Ⅱ(LC3-Ⅰ/Ⅱ)和Beclin1蛋白表达变化。结果 MTT结果显示,随着给药浓度的增加,丹参酮ⅡA对D341细胞增殖的抑制作用不断增强,差异有统计学意义(P<0.05);同一浓度下,随着时间延长,D341细胞增殖抑制率亦逐渐增加。流式细胞仪结果显示,丹参酮ⅡA可显著诱导D341细胞凋亡(P<0.05),随着给药浓度的增加,D341细胞凋亡率不断增加(P<0.05)。透射电镜结果显示,对照组D341细胞膜完整,染色质呈均匀分布;5.0mg/L丹参酮ⅡA处理72h后发现,细胞核染色质浓缩、边缘化,一些细胞明显裂解。Western blot结果显示,随着丹参酮ⅡA浓度的增加,D341细胞中mTOR水平差异无统计学意义(P>0.05),p-mTOR和VEGF水平逐渐降低(P<0.05),LC3-Ⅰ水平逐渐降低(P<0.05),LC3-Ⅱ水平逐渐升高(P<0.05),Beclin1蛋白表达水平逐渐升高(P<0.05)。结论丹参酮ⅡA可抑制髓母细胞瘤D341细胞增殖,诱导D341细胞凋亡,促进D341细胞自噬。
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单位成都市第五人民医院