可溶性mPDL1-hIgGFc表达载体构建、表达及对诱导细胞增殖与凋亡的影响

作者：杨敬; 廖雯君; 王国华; 何峰蓉; 朱惠芬; 戴红; 周玮; 吴雄文; 张金元; 沈关心

来源：中华微生物学和免疫学杂志, 2008, 28(9): 795-798.

DOI：10.3321/j.issn:0254-5101.2008.09.007

• 小鼠PDL1
• 混合淋巴细胞培养
• 增殖
• 凋亡

目的 可溶性mPDL1-hIgGFc(mouse PDL1-human IgG Fc)表达载体的构建与表达,及其对诱导细胞增殖与凋亡的研究.方法 以含有mPDL1基因的载体pmPDL1为模板,采用PCR的方法获得mPDL1胞外段基因,定向连接于含有hlgGFc基因片段的载体phIgGFc,构建表达载体pmPDL1-hIgGFc;采用脂质体将重组子转染CHO细胞,转染后的CHO命名为cHOp;ELISA和Western blot法检测目的 蛋白的表达,流式细胞术检测CHOp培养上清对混合淋巴细胞培养(MLC)的影响.结果 测序结果和酶切鉴定显示构建的表达载体pmPDL1-higGFc完全正确;ELISA和Westernblot法检测CHOp培养上清中有目的 蛋白表达;流式细胞术检测表明CHOp培养上清可体外抑制小鼠MLG,并诱导活化T细胞凋亡,其效应呈剂量依赖性.结论 成功构建mPDL1-hIgGFc表达载体;mPDL1-hIgGFc在体外可抑制MLC和诱导活化T细胞凋亡,具有负性调节T细胞的功能.

• 单位
  湖北大学; 中国人民解放军第四五五医院; 华中科技大学同济医学院