6-磷酸果糖激酶-2/果糖双磷酸酶-2同工酶3基因对前列腺癌细胞增殖的影响

作者：严彬元; 王骏; 李小娟; 吴涛; 曾春贤; **; 温志强; 李志广; 孙东麟; 权伟合; 周青春; 唐金琦; 续奇志; 温星桥

来源：中华实验外科杂志, 2017, 34(10): 1661-1663.

DOI：10.3760/cma.j.issn.1001-9030.2017.10.012

• 6-磷酸果糖激酶-2/果糖双磷酸酶-2同工酶3
• 前列腺癌
• 增殖

目的观察6-磷酸果糖激酶-2/果糖双磷酸酶-2同工酶3(PFKFB3)在前列腺癌组织中的表达及其对PC3和DU145前列腺癌细胞增殖的影响。方法采用免疫组织化学染色(抗体浓度1:50)方法,观察PFKFB3基因在前列腺癌组织及癌旁组织中的表达。实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR,40个循环,188 bp)Western blot法[30μl,10%十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)]检测PFKFB3 mRNA和蛋白在前列腺癌细胞及前列腺上皮细胞中的表达。采用平板克隆形成实验(40μmol/L H2O2)与细胞生长实验[20μl噻唑蓝(MTT)]对比观察敲除PFKFB3基因前后前列腺癌细胞的生长。结果PFKFB3基因在前列腺癌组织中的表达(2.42±0.16)明显高于癌旁组织(1.38±0.10),差异有统计学意义(P=0.031);前列腺癌细胞中PFKFB3 mRNA和蛋白表达水平均高于前列腺上皮细胞,分别为2.02.6倍和2.54.5倍(P=0.015);敲除PFKFB3基因后,平板克隆形成实验结果显示细胞克隆形成率为敲除前的22%35%(P=0.018),细胞生长实验结果显示前列腺癌细胞的增殖在第4天受抑制,为对照组的28%30%(P=0.026)。结论PFKFB3基因在前列腺癌细胞和组织中高表达,PFKFB3基因对前列腺癌细胞的增殖有一定的促进作用。

• 单位
  南方医科大学深圳医院