云南药用野生稻高质量染色体DNA的制备

作者：李娥贤; 殷富有; 张敦宇; 陈越; 余腾琼; 雷涌涛; 肖素勤; 程在全; 柯学^*

来源：作物杂志, 2020, (05): 103-109.

DOI：10.16035/j.issn.1001-7283.2020.05.016

• 药用野生稻
• 染色体DNA
• DNA制备

药用野生稻是我国3种野生稻之一,蕴含丰富的优异基因资源,但由于其CC基因组与栽培稻的AA基因组差异大,远缘杂交不亲合,不易获得后代材料,导致育种中优异基因无法利用。构建大片段基因组文库是研究及利用基因的重要方法,而提取高质量的染色体DNA是建立BIBAC等大片段基因组文库的前提,但按常规方法很难从药用野生稻中提取到Mb级的染色体DNA,需要对提取体系进行优化。本研究对取材与研磨、细胞核的分离与包埋、组蛋白的去除与DNA释放、DNA的酶解与回收等实验步骤进行优化,从药用野生稻中成功提取出1.9Mb的高质量染色体DNA,并对酶解消化体系进行了摸索,制备的染色体DNA可用于构建大片段基因组文库。

• 单位
  云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所