酿酒酵母蔗糖关键代谢途径基因的敲除及其生长特性的变化分析

作者：韩丽; 肖成志; 韩丹亚; 王丽娇; 何培新

来源：中国酿造, 2022, 41(03): 69-75.

• 酿酒酵母
• 基因敲除
• 蔗糖代谢
• 蔗糖水解酶
• 生长特性

该研究以酿酒酵母(Sacchromyces cerevisiae)IMX581为出发菌株，利用Crispr-Cas9基因编辑的方法敲除其蔗糖消耗途径中的蔗糖转化酶基因Suc2和麦芽糖酶基因MAL32、MAL12、MAL22，构建工程菌株IMX581△Suc2和IMX581△Suc2△MAL32△MAL12△MAL22，并对其生长特性及蔗糖消耗情况进行分析。结果表明，当初始OD600 nm值为0.1时，菌株IMX581△Suc2在以蔗糖为唯一碳源的培养基上仍然可以生长，但培养56 h时，生物量是出发菌株IMX581的52%，而菌株IMX581△Suc2△MAL32△MAL12△MAL22几乎不生长。当初始OD600 nm值为0.1、5.0及10.0时，菌株IMX581△Suc2和IMX581△Suc2△MAL32△MAL12△MAL22培养72 h后，蔗糖的消耗率较出发菌株IMX581均显著下降，分别为28.5%、35.5%、38.5%和7.0%、18.4%、22.5%。因此，成功构建了显著降低蔗糖消耗的菌株IMX581△Suc2△MAL32△MAL12△MAL22，为研究酿酒酵母对蔗糖的利用及调控提供了参考。

• 单位
  食品与生物工程学院; 郑州轻工业大学