独活寄生汤延缓人椎间盘髓核细胞退变机制的研究

作者：刘宗超; 蒋燕; 黄陈翼; 刘勇; 韦章超; 刘世贵; 付至江; 马川

来源：中国中药杂志, 2018, 43(13): 2764-2769.

DOI：10.19540/j.cnki.cjcmm.20180503.001

• 独活寄生汤
• SDF-1
• NF-κB
• 椎间盘退变

探讨独活寄生汤(Duhuo Jisheng decotion,DHJSD)延缓人椎间盘退变的作用及其可能的分子机制。术中摘取人椎间盘标本,根据磁共振Pfirrmann退变程度分为正常组和退变组。Western blot和Real-time PCR法检测椎间盘组织中炎症因子TNF-α,IL-1β和胞外基质分解酶MMP-3,MMP-13的表达。体外培养人髓核细胞,用CCK-8法测定在基质细胞衍生因子1(stromal cell-derived factor-1,SDF-1,10μg·L-1)和各种不同浓度的DHJSD共同处理下,髓核细胞的活力情况,并筛选出DHJSD合适的作用浓度。随后分为3组:对照组、SDF-1组、DHJSD+SDF-1组,检测各组细胞TNF-α,IL-1β,Agg,co IⅡ,MMP-3,MMP-13的表达情况。为进一步探讨其分子机制,采用NF-κB抑制剂(BAY11-7082)或CXCR4-siRNA转染髓核细胞,检测CXCR4,NF-κB主要基团P65磷酸化水平(p-P65)以及P65核转移情况,细胞炎症因子和细胞外基质的表达情况。通过检测2组椎间盘组织发现退变髓核组织中TNF-α,IL-1β,MMP-3,MMP-13的表达明显升高(P<0.05)。而体外细胞实验发现,CCK-8法检测显示当DHJSD质量浓度为300 mg·L-1时髓核细胞的活力明显增加。将实验分为3组后,检测发现与单独SDF-1组相比,用DHJSD处理后TNF-α,IL-1β,MMP-3,MMP-13含量明显降低,而Agg和co IⅡ表达明显上升。采用CXCR4-siRNA转染髓核细胞后发现,SDF-1可以明显提高CXCR4和p-P65的表达,促进P65向核内转移,而给予DHJSD或CXCR4-siRNA处理后其作用明显被抑制。进一步采用BAY11-7082处理髓核细胞后发现,能明显降低髓核细胞炎症因子TNF-α和IL-1β,以及胞外基质分解酶MMP-3和MMP-13的表达。独活寄生汤可抑制炎症因子表达,促进胞外基质合成,其潜在机制与SDF-1/CXCR4/NF-κB信号通路有关。

• 单位
  西南医科大学