摘要
目的将突变SOD1cDNA亚克隆入酵母穿梭表达质粒pGBKT7中。方法利用PCR方法从重组子pEGFP-N2-mSOD1中扩增突变的SOD1cDNA片断。以EcoRⅠ/SalⅠ双酶切突变SOD1cDNA片断和酵母穿梭表达质粒pGBKT7,在T4 DNA连接酶的作用下,连接突变SOD1cDNA片断和酵母穿梭表达质粒pGBKT7。转化感受态DH5α,筛选重组子,进行双酶切和测序鉴定。结果经酶切和测序鉴定,突变SOD1cDNA成功地亚克隆入酵母穿梭表达质粒pGBKT7中。结论亚克隆成功,可以对目的基因进行下一步研究。
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单位第三军医大学西南医院; 神经内科