利用噬菌体展示技术筛选Cry2Ab毒素受体表位的方法

作者：齐佳; 刘晨曦; 吴孔明

来源：应用昆虫学报, 2012, (05): 1397-1405.

• 噬菌体展示
• 表位筛选
• Cry2Ab phage display
• epitope mapping
• Cry2Ab

苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)产生的内毒素具有杀虫活性,Cry2Ab毒素作为Bt棉花的杀虫活性蛋白,其在靶标昆虫体内的结合受体及作用位点尚不清楚,本研究采用噬菌体展示(phage display)的方法,经4轮的"吸附—洗脱—扩繁"筛选,并对阳性克隆所携带的外源DNA片段进行序列测定后,得到2段能够与活化Cry2Ab毒素相互作用的多肽序列,通过酶联免疫结合试验(ELISA)进一步证明,这2段多肽序列与活化Cry2Ab毒素具有较高的亲和力和特异性,结果表明,利用该方法能够由噬菌体随机肽库中高效捕获亲和序列,筛选到与活化Cry2Ab毒素具有高亲和力的多肽,该序...

• 单位
  中国农业科学院植物保护研究所; 植物病虫害生物学国家重点实验室