摘要
漆酶CueO是一种含有4个铜原子的多铜氧化酶,是一种环境友好型酶,可以参与木质素的降解,并催化多种芳胺类小分子化合物的氧化。本文以E.coli BL21为表达菌株,优化表达条件,证明CueO的基因可以在大肠杆菌中异源重组表达。通过镍柱亲和层析法和分子排阻层析法纯化得到了目的蛋白,表达量为40 mg/L。采用电感耦合等离子体-原子发射光谱及铜配位显色的方法计算了CueO中的铜嵌入率。最后,以CueO作为催化剂,钌(Ⅱ)-三联吡啶金属配合物[Ru(bpy)3]2+作光敏剂,同时抗坏血酸钠作为牺牲还原剂,在可见光照射15 h后,气相色谱检验该体系可将CO2还原为CO,催化反应的转换数(TON)值为192。该体系是以水为溶剂,避免了有机溶剂的使用。此外,通过对CueO进行点突变,还可以改变光催化CO2还原活性。
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